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| 生化科研試劑 >> 分子生物試劑及試劑盒 >> 核酸分離與純化 |
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PAGE凝膠銀染試劑盒
PAGE gel silver dye kits |
| 貨號 |
品名 |
規格 |
包裝 |
單價 |
貨期 |
庫存 |
| 1227182312 |
PAGE凝膠銀染試劑盒 |
1L |
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1699元 |
現貨 |
3天 |
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| 性 狀： |
注：1L規格指可配制的硝酸銀染色液的體積，實際使用次數根據PAGE膠大小不同而不同。 產品簡介: 核酸銀染的原理是銀離子可與核酸形成穩定的復合物，然后用還原劑如甲醛在堿性環境下使Ag+還原成銀顆粒，可把核酸電泳帶染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝膠電泳染色。其靈敏度比EB高200倍，該產品整個過程只需要20分鐘，操作簡單，靈敏度高，能檢測到10ng以下的DNA條帶。
操作步驟: |
| 質量標準： |
一、染色液配制
需要配制的染色液體積根據PAGE膠的大小而定，一般的mini-PAGE膠需要20-30mL。配制用的器皿清洗干凈后用去離子水涮洗，染色液須用去離子水配制，現用現配。如果配制的溶液體積不是100mL，可以按比例改變各成分用量。
1，硝酸銀染液：稱取0.2g硝酸銀，加入到90ml去離子水中徹底溶解，加入10ml溶液A混勻，現用現配。
2，顯色液：分別取溶液B和溶液C 各10ml加入80ml去離子水中混勻，現用現配。
3，終止液：取終止液D 10ml加去離子水稀釋至100ml，現用現配。
二、染色：
1，PAGE電泳結束后，將PAGE蛋白膠轉移至玻璃平皿或搪瓷盤中，用去離子水漂洗兩遍，每次2min。
2，將PAGE膠轉移至硝酸銀染液中，使染液沒過PAGE膠，室溫染色10min?？芍糜趽u床上緩慢搖晃，使其染色均勻。
3，棄去染色液，用去離子水快速漂洗三次，每次半分鐘。
4，將PAGE膠轉移至顯色液中，使顯色液沒過PAGE膠，室溫搖晃顯色至條帶清晰可見。
5，可選，將PAGE膠轉移至終止液中，終止顯色1min。
6，銀染后PAGE膠可拍照保存或用于后續試驗。
注意事項：
1.銀染主要出現在PAGE膠的表面，使用薄膠（0.5-0.75mm）可以提高靈敏度。
2.對于考馬斯亮藍染色的SDS-PAGE膠，可用甲醇將膠漂洗后，繼續進行銀染?？既具^程中的乙酸會干擾銀染，因此要確保將PAGE凝膠中殘留的乙酸徹底洗凈。
3.不同蛋白質對銀染的反應是不一樣的，尤其是堿性蛋白染色效果差。因此，不宜用銀染測定不同蛋白的比例。
4.染色過程中，緩慢的振蕩是必要的，一般選擇40-60 rpm.
5.凝膠表面的裂紋多是由于壓力、手印及表面干燥所致，所以全程中都應帶手套操作。
6.PAGE凝膠背景呈均一的黑色多是水中的雜質引起的，所以溶液的配制應使用電導率小于1 μS的去離子水。
7.如果染色后有呈灰塵或煙霧狀灰色或棕色的沉淀出現在凝膠表面，可能是在幾步漂洗過程中洗得不夠徹底，或是染色過程時溫度太低。
8.較深的銀染背景多是丙烯酰胺中的雜質所致。
9.PAGE膠中的甘油、尿素、甘氨酸、Triton X-100和兩性電解質這些物質會干擾銀染。
10.室溫操作時，溫度的波動往往會干擾銀染的效果，恒溫水浴可以解決這個問題。
11.憑借戊二醛預處理可以使各種蛋白質的染色提高40倍。
12.染色使用的玻璃器皿必須非常干凈，用酸浸泡可以滿足要求。
13.銀染應盡快照相，隨著時間延長，蛋白條帶會變淺，而背景會加深。
14.銀染容器最理想的是玻璃平皿，其次是搪瓷盤和密胺塑料盤等。
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| 貯 存： |
室溫(15℃-25℃) 干燥保存，復檢期12個月。 |
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滬公網安備 31012002003054號
