| 產品簡介：本試劑盒采用可以特異性結合核酸的硅基質膜和堿裂解法提取細菌質粒DNA，從50-100ml大腸桿菌LB培養液中，可快速提取200-300μg純凈地高拷貝質粒DNA。所采用的內毒素清除劑能有效地去除質粒溶液中的內毒素，純化的質粒內毒素含量小于0.1EU/ug。吸附柱中采用的硅基質材料能高效、專一地吸附DNA，可最大限度去除雜質蛋白質及細胞中其他有機化合物。使用本試劑盒提取的質粒DNA可適用于各種常規的分子生物學試驗，包括酶切、PCR、測序、連接、轉化和轉染等試驗。本試劑盒無需使用酚、氯仿等有毒試劑，操作安全。 注意事項： 1、溶液P1在使用前先加入RNaseA(將試劑盒中提供的RNaseA全部加入)，混勻，置于2-8℃保存。
2、第一次使用前應按照試劑瓶標簽的說明在漂洗液中加入無水乙 醇配制成工作液(向15ml的漂洗液中加入60ml的無水乙醇)。 3. 使用前請先檢查溶液P2、P3和P4是否出現混濁，如有混濁現象，可在37℃水浴中加熱幾分鐘，待溶液恢復澄清后再使用。 4. 洗脫緩沖液體積不應少于500ul，體積過小影響回收效率;洗脫液的pH值對洗脫效率也有影晌，若需要用水做洗脫液應保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調至此范圍)， pH值低于7. 0會降低洗脫效率， DNA產物應保存在-20℃，以防DNA降解。 5. 質粒DNA濃度＞1mg/ml時清除內毒素效率降低。由于質粒DNA本身的性質，清除過程可導致部分質粒DNA丟失，但內毒素卻能得到最大限度清除。 6. 所有溶液應用無內毒素的高純水配制，所有器械材料均應不含內毒素，玻璃器皿可高溫烘烤，非揮發性水溶液可高壓處理。 7. DNA濃度及純度檢測：得到的質粒DNA純度與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關。 得到的DNA可用瓊脂糖疑膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。 DNA應在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為1相當于大約50μg/ml雙鏈DNA、 40μg/ml單鏈DNA。OD260/OD280比值應為1.7-1.9，如果洗脫時不使用洗脫緩沖液，而使用去離子水，比值會偏低，因為pH值和離子存在會影響吸光值，但并不表示純度低 |
滬公網安備 31012002003054號
