產品簡介: Taq Plus DNA Ploymerase是Taq酶和Pfu酶的混合物,既有5’→ 3’核酸外切酶活性,又有3’→5’核酸外切酶活性。Taq Plus DNA Ploymerase兼具Taq DNA Ploymerase的高效率及Pfu DNA Ploymerase的高保真性的特點。與Taq酶相比,Taq Plus DNA Ploymerase具有擴增長度增加(對模板有效擴增長度可達10kb)、保真度好等優點;與Pfu酶相比,具有擴增速度快、反應效率高的優勢。常用于一些對保真度要求高和模板結構復雜(如GC含量高、有二級結構等)的PCR擴增。其PCR產物可直接進行TA克隆,如需提高克隆效率,建議先純化,加A后再進行TA克隆。 活性定義: 1單位(U) Taq plus DNA Polymerase活力定義為在74℃,30分鐘內,以活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板,將10 nmol脫氧核苷酸摻入到酸不溶物質所需的酶量。 質量控制: SDS-PAGE檢測Taq plus DNA Polymerase純度大于99%;經檢測無外源核酸酶活性;PCR方法檢測無宿主殘余DNA;能有效地擴增人類基因組中的單拷貝基因;室溫存放一周,無明顯活性改變。 酶貯存緩沖液: 20mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 100 mM KCl ; 50% glycerol;其他成份。 適用范圍: 用于DNA的高保真擴增,如基因表達克隆、基因定點突變、細胞內基因點突變的分析(SNP)和末端補平等。 注意事項: 1、PCR反應體系加樣時,最后一步加入Taq Plus DNA Ploymerase,整個過程宜在冰上操作。 2、取Taq DNA Ploymerase做PCR反應時,請用高壓滅菌處理過的吸頭。 3、10×Taq Plus Buffer中含15 mM Mg2+,如PCR反應需要較高Mg2+濃度,請另行加入。 4、一般情況下,Taq Plus DNA Ploymerase 可以很好地擴增10kb以下的片段。能否成功擴增更長的片段,主要與模板的結構和引物的設計有關,如果擴增長片段有困難,最好選用Long Taq DNA Ploymerase。 |